中間普雷沃菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
分揀連接蛋白13(SNX13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　95%　費氏另類弧菌　100g

分揀連接蛋白17(SNX17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　95%　黃曲霉　25g

微纖絲關聯(lián)蛋白4(MFAP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　95%　枯草芽孢桿菌　500g

腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　D,98%　蘇云金芽孢桿菌阿萊亞種　5g

髓細胞觸發(fā)受體2(TREM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　食砜節(jié)桿菌　100g

細胞程序性死亡蛋白6(PDCD6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　熒光假單胞菌　1g

細胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　基利恩帚枝霉　25g

纖調蛋白(FMOD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　異?？藵h姆酵母　5g

Ⅴ型膠原α2(COL5α2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%(T)　金針菇F8909　1g

細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%(T)　枯草芽孢桿菌　5g

C1q腫瘤壞死因子相關蛋白9(C1QTNF9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥99%　犁頭霉屬　1g

角蛋白16(KRT16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　≥99%　枯草芽孢桿菌　5g

層粘連蛋白γ1(LAMγ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　黑曲霉　1g

Smad同源物2(Smad2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　賴氨酸芽胞桿菌屬　250mg

神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白1(NXPH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　98%　棉刺盤孢　5g

唾液酸酶2(SIAL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　蘋果黑腐皮殼　1g

肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅵ(PADI6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　97%　米曲霉　5g

原肌球調節(jié)蛋白3(TMOD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)　20 wt. % suspension in THF　擴展青霉　100g
中間普雷沃菌探針法熒光PCR檢測試劑盒CHRAC1蛋白抗體PDGF-B  血小板源性生長因子-B（抗原）50 ml

ATP依賴的解螺旋酶抗體PDGF-R-A  血小板源性生長因子受體-A（抗原）250 ml

X染色體開放閱讀框6抗體PDGF-R-B  血小板源性生長因子受體-B（抗原）100 ul

硫酸軟骨素酶2抗體PMP-22(Peripheral Myelin Proin)  外周髓鞘蛋白-22多肽5 ml each

碳水化合物磺基轉移酶10抗體PI3K  脂酰肌醇激酶（抗原）25 ml each

碳水化合物磺基轉移酶11抗體BMP4(bone morphogenetic proin 4)  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4（抗原）50 ml

碳水化合物磺基轉移酶12抗體PLGF (Placenta growth factor)  胎盤生長因子（多肽抗原）250 ml

碳水化合物磺基轉移酶13抗體PLGF (Placenta growth factor)  胎盤生長因子（多肽抗原）100 ul

碳水化合物磺基轉移酶14抗體PLGF (Placenta growth factor fragment)(human)  胎盤生長因子（多肽抗原）20 ul