熒光定量PCR試劑盒技術：
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
碲標準溶液(100μg/ml，基體:HCI)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)酸氫氨鈉

銩標準溶液(1000µg/mL,基體：10%HCL)Phospho-SLP-76 (Ser376) (D7S1K) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5,6-二氫-4H-吡咯并[3,2,1-IJ]喹啉

釩標準溶液(500mg/L,溶劑：水)FANCD2 (D5L5X) Rabbit mAb硝基-1,二硫酸鹽

釩標準溶液(100mg/L,基體:1%HCI)HUS1 (D4J9H) Rabbit mAb5-溴-2-(硫代甲基)嘧啶

鐿標準溶液(1000μg/ml)BCAT1 (D4V2T) Rabbit mAbN,N-二異基乙三酸鹽

鐿標準溶液(1000μg/ml in 10%HCl)Phospho-Met (Tyr1234/1235) Blocking Peptide4,5-二氯-2-甲基噠-酮

鋅標準溶液(1000mg/L,溶劑：1%鹽酸)Ibrutinib3,4',5-*氧基-反-二代乙

鋅標準溶液(500mg/L,溶劑：1%鹽酸)ROR1 (D6T8C) Rabbit mAb2-ACETAMIDO-BROMOANISOLE

二溴一氯標準溶液(1.0mg/ml,基體：甲)MUC1-C (D5K9I) XP® Rabbit mAb甲基-1-萘甲酸

2,二甲酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)ERG (A7L1G) Rabbit mAb (PE Conjuga)METHYL IMIDAZO[1,2-A]PYRIDINE-5-CARBOXYLA

3,二甲酚標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)TKS5 Antibody3,4'-二氨基二烷

鄰二甲酸二乙酯標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)TRPC6 (D3G1Q) Rabbit mAbN,N'-乙基雙酰

鄰二甲酸二丁酯標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)Phospho-CaMKK2 (Ser495) Antibody雙(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)化銅

2,二溴酰標準溶液(490mg/L,基體:乙酸乙酯)Orexin (D6G9T) Rabbit mAb氧基乙

1,1-二氯乙烷標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)CaMKK2 (D8D4D) Rabbit mAb

反式-1,2-二氯乙標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)eIF4E (C46H6) Rabbit mAb (Biotinylad)7-甲氧基咪唑并[1,2-A]吡啶-8-甲

鄰二甲酸二正壬酯標準溶液(136.0μg/ml,溶劑:甲)SIX1 (D5S2S) Rabbit mAb6-乙酰氧基正己酸甲酯

乙標準溶液(1000μg/ml,溶劑：二硫化碳)CAR (D3W3G) Rabbit mAb1-BOC-5-(METHOXYCARBONYL)INDOLE-2-BORONIC ACID
熱帶念珠菌探針法熒光PCR檢測試劑盒包蟲抗體IgG ELISA試劑盒Inhibin Beta C  抑制素βC抗體20 ul

膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒Insulin  胰島素抗體100 ul

膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒Insulin (pig)  胰島素抗體 （豬）100 ul

伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒rInsulin   抗重組胰島素抗體100 ul

半糖凝集素-7(Gal-7)ELISA試劑盒rInsulin monoclonal (pig)  抗胰島素單克隆抗體（豬）100 ul

半糖(Galactose)ELISA試劑盒rInsulin human monoclonal  重組胰島素單克隆抗體100 ul

板層素相關多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒Insulin Receptor  胰島素受體抗體100 ul

瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒Insulin Receptor alpha  胰島素受體α抗體100 ul

百日咳病毒抗體(IgM)ELISA試劑盒Insulin Receptor Alpha  胰島素受體α抗體100 ul