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新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-28
點擊次數:
1355
產品特點:
新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

產品名稱

新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Cryptococcus neoformansPCR

 貨號

 HE30865-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢:
    1.   特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
Fmoc-L-羥脯氨酸/N-芴甲氧羰基-L-羥脯氨酸/FMOC-L-4-羥基脯氨酸/N-FMOC-順式-4-羥基-D-脯氨酸/(2S,4R)-1-芴甲氧羰基-4-羥基吡咯烷-2-羧酸/Fmoc-Hyp-OH 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;500mg

FMOC-L-蘇氨酸/N-芴甲氧羰基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr-OH 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g

FMOC-L-色氨酸/N-芴甲氧羰基-L-色氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-L-色氨酸/Fmoc-Trp-OH 質量規格:95%,標準品,大豆來源 包裝;25g

FMOC-D-色氨酸/N-芴甲氧羰基-D-色氨酸/N-[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]-D-色氨酸/Fmoc-D-Trp-OH 質量規格:>90 %,GC 包裝;5g

FMOC-D-纈氨酸/芴甲氧羰基-D-纈氨酸/Fmoc-D-Val-OH 質量規格:>90%,GC 包裝;100mg

對氯苯甘氨酸/DL-對氯苯甘氨酸/DL-2-(4-)甘氨酸/DL-α-氨基-4-氯-/PCPG 質量規格:>98%,BR 包裝;25mg

DL-鄰氯苯甘氨酸/DL-2-氯苯甘氨酸/DL-鄰氯-α-氨基/混旋鄰氯苯甘氨酸/DL-2-(2-Chlorophenyl)glycine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

L-鄰氯苯甘氨酸/(S)-2-氯苯甘氨酸/L-(+)-鄰氯苯甘氨酸/S-(+)-鄰氯苯甘氨酸/L(-)-鄰氯苯甘氨酸/右旋鄰氯苯甘氨酸/L-(+)-2-甘氨酸/(S)-α-氨基-(2-)乙酸/L-(+)-2-Chlorophenylglycine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g

氯甲酸芐酯/氯甲酸苯甲基酯/苯甲氧基/苯甲氧羰酰氯/芐基/芐酯基氯/甲酸氯芐酯/苯甲氧基甲酰氯/芐氧羰酰氯/CBZ-CL 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

N-苯甲酰-L-纈氨酰甘氨酰-L-精氨酸對硝基鹽酸鹽/N-BZ-Val-Gly-Arg PNA•HC1 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g

D-纈氨酰-L-白氨酰-L-賴氨酸對硝基/D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酰對硝基/D-Val-Leu-Lys PNA•2HC1 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g

Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對硝基醋酸鹽/Z-甘氨酰-L-脯氨酰-L-精氨酰對硝基乙酸鹽/Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

肌氨酸鈉/N-甲基氨基乙酸鈉/N-甲基甘氨酸單鈉鹽/N-甲基甘氨酸鈉/sodium Sarcosine 質量規格:AR,>98% 包裝;5g

L-天門冬氨酸鈣/L-天冬氨酸鈣/生力鈣/L-Aspartic acid calcium salt 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;250mg

L-谷氨酸-5-甲酯/L-谷氨酸γ-甲酯/L-γ-谷氨酸甲酯/L-2-氨基戊二酸-5-甲酯/L-Glutamic acid 5-methyl ester 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g

N-芐基甘氨酸乙酯/N-Benzylglycine ethyl ester 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;5g

L-叔亮氨酸/L-2-氨基-3,3-二甲基丁酸/L-tert-Leucine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 包裝;1g
新生隱球菌PCR檢測試劑盒說明書Armillariella│mellea 中文名稱:密環菌種屬:Armillariella│mellea提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25℃ 純度:98%

Thermoanaerobacter│siderophilus 中文名稱:嗜金屬熱厭氧桿菌(00開頭的農業均無法提供)種屬:Thermoanaerobacter│siderophilus分離基物:油田采出提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產甲烷培養方法培養基:482生長條件:65℃存儲條件:定期移植法 純度:98%

Paenibacillus│peoriae 中文名稱:皮爾瑞俄類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│peoriae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養物模式菌株:no培養方法培養基:33生長條件:20℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%

Paenibacillus│pabuli 中文名稱:飼料類芽胞桿菌種屬:Paenibacillus│pabuli分離基物:石油污染土提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:纖維素降解菌培養方法培養基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99%

Virgibacillus│picturae 中文名稱:壁畫枝芽胞桿菌種屬:Virgibacillus│picturae分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:33生長條件:20-30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99%

Rhodococcus│gordoniae 中文名稱:戈氏紅球菌種屬:Rhodococcus│gordoniae分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養基:中以100mg/L的苯酚為碳源培養,24h內對100mg/L的苯酚降解率99%培養方法培養基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:99%

Sphingosinicella│microcystinivorans 中文名稱:食微囊藻素鞘氨醇胞菌種屬:Sphingosinicella│microcystinivorans分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養基:中添加1%LB情況下,3d對20ppm降解率46.5%;對100p和降解率20-25%,降解過程中有紅色中間代謝產物產生。適生長溫度為28℃。培養方法培養基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:≥99%

Myroides│sp. 中文名稱:香味菌種屬:Myroides│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:在無機鹽培養基:中添加100mg/L的N-甲基,降解率達31%。培養方法培養基:33生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;定期移植法 純度:98%

 

產品相關關鍵字: 新生隱球菌 PCR檢測試劑盒 50T
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