紅色豬圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
    1.   特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實(shí)用性：產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
3.5% NaC1葡萄糖磷酸鹽胨發(fā)酵管 包裝;25mg

氨基酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管 包裝;5mg

3% NaC1氨基酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管 包裝;10g

3.5% NaC1氨基酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管 包裝;5g

鳥氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 包裝;500g

3% NaC1鳥氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;100g

3.5% NaC1鳥氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;25g

精氨酸脫羧酶對(duì)照發(fā)酵管 包裝;5g

3% NaC1精氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;100g

3.5% NaC1精氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;25g

賴氨酸脫羧酶肉湯發(fā)酵管 包裝;100g

3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;25g

3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 包裝;500g

色氨酸肉湯發(fā)酵管 包裝;100g

MR-VP發(fā)酵管 包裝;25g

尿素酶發(fā)酵管 包裝;5g

明膠發(fā)酵管 包裝;100ml
紅色豬圓線蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書甲氨蝶呤有效期: 3年溶解性: 10mg/ml 1M NaOH英文名稱: MethotrexateCAS: 59-05-2

毛地黃皂苷有效期: 3年溶解性: 10mg/ml  EtOH來源: 紫花毛地黃的葉和種子別名: 洋地黃皂苷;毛地黃皂甙;毛地黃葉苷;地芰脫皂苷

N,N,N,N-四甲基對(duì)苯二胺有效期: 2年溶解性: 50mg/mL in water英文名稱: N,N,N',N'-Tetramethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride (TMPD)CAS: 637-01-4

乙酸銨 HPLC有效期: 3年級(jí)別: HPLC溶解性: 200mg/ml in water別名: 醋酸銨;乙酸铔

對(duì)氨基苯磺酸鈉有效期: 3年級(jí)別: AR溶解性: 100mg/ml in Water英文名稱: 4-Amino-benzenesulfonic acid monosodium salt

硫酸銨  GR級(jí)別別名: 硫氨;硫銨;硫酸铔;英文名稱: Ammonium sulfateCAS: 7783-20-2分子式: H8N2O4S

異檸檬酸三鈉鹽水合物別名: 1-羥基丙烷-1,2,3-*酸三鈉鹽英文名稱: Isocitric acid trisodium saltCAS: 1637-73-6分子式: C6H5Na3O7

三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L)儲(chǔ)存條件: -20℃，有效期1年單位: 瓶其它:

有效期：12個(gè)月

保存溫度： -20℃

三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate，ATP)分子的結(jié)構(gòu)可簡寫成A-P~P~P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基團(tuán)，～代表一種特殊的化學(xué)鍵，是體內(nèi)組織細(xì)胞一切生命活動(dòng)所需能量的直接來源，被譽(yù)為細(xì)胞內(nèi)能量的“分子貨幣”，儲(chǔ)存和傳遞化學(xué)能。在有機(jī)生命體內(nèi)，一般三磷酸腺苷(ATP)水解失去一個(gè)磷酸根，即斷裂一個(gè)高能磷酸鍵，并釋放能量并產(chǎn)生ATP。三磷酸腺苷溶液(ATP,10mmol/L)由ATP.2Na、Tris-HCl、去離子水組成，可用于催化酶的反應(yīng)，以及提供能量。

注意事項(xiàng)：

避免反復(fù)凍融，否則ATP效率會(huì)降低。

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

注意：

1.本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。

2.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和操作。