庫蚊通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
4,7-二羥基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC))Dab1 Antibody1-N-Boc-順式-1,環(huán)己二

5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))MNDA (3C1) Rat mAb2,5-二氯乙酮

1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))PTPA/PPP2R4 Antibody異酸基三乙氧基硅烷

TPP(=四基卟啉)Phospho-Jak1 (Tyr1034/1035) AntibodyN-叔丁氧羰基-N'-芐氧羰基-L-鳥氨酸

TMPyP[=α,β,γ,δ-四(1-甲基吡啶嗡-基)卟吩對甲磺酸鹽](>98.0%(N))Jak1 AntibodyD-別蘇氨酸

TCPP[=四(羧基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))ALK (C26G7) Rabbit mAb基三丁基錫

5,10,15,20-四(吡啶基)卟啉(>97.0%(N))RasGRP3 (C33A3) Rabbit mAb氨基-甲酸

8-巰基喹啉鹽酸鹽(>95.0%(T))Granzyme B (D2H2F) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氨基-2-甲酸

偶氮甲H(>97.0%(T))ApoA5 (2G1H11) Mouse mAb2-溴-4'-羥基乙酮

縮氨基-2-硫酚(>98.0%(HPLC)(N))SMARCE1/BAF57 (E6H5J) Rabbit mAb(R)-(-)-羥基丁酸乙酯

N-甲基糠酰羥肟酸(>99.0%(HPLC))S5a/PSMD4 (D17E4) Rabbit mAb酸芐酯

2,2'-二辛可寧酸二鹽水合物(>98.0%(HPLC))Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (APC Conjuga)基磺酸鈉

氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))NME1/NDKA (G19) Antibody聚乙二二甲

N-肉桂酰-N-(2,二甲基)羥(>98.0%(HPLC)(N))Ras (27H5) Rabbit mAb1-甲基-1H-吡唑-甲

5,6-二基-(2-吡啶基)-1,2,三(>98.0%(HPLC)(T))Ras (27H5) Rabbit mAb對氯乙酰氯

α-聯(lián)呋喃甲酰二肟(>97.0%(W))HDAC7 (D4E1L) Rabbit mAb7-羥基-5-甲基-1,3,三氮吲哚利

5-二甲氨基-2-亞酚鹽酸鹽(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-ALK (Tyr1604) Antibody乙炔基吡啶

基-2-吡啶基酮肟(>98.0%(T))Phospho-ALK (Tyr1604) Antibody乙炔基吡啶
庫蚊通用探針法熒光PCR檢測試劑盒巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒PSAP/PAP (human)  前列腺酸性酸酶抗體()20 ul

精脲水解酶(AGMAT)ELISA試劑盒PSCA   前列腺干細(xì)胞抗原抗體100 ul

精氨酸酶1(ARG1)ELISA試劑盒PSD93  突觸后密度蛋白93抗體100 ul

精氨酸加壓素受體1A(AVPR1A)ELISA試劑盒Phospho-PSD93 (Tyr340)  酸化突觸后密度蛋白93抗體100 ul

精氨酸(Arg)ELISA試劑盒PSD95  突觸后密度蛋白95抗體100 ul

緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒Phospho-PSD95 (Tyr236/Tyr240)  酸化突觸后密度蛋白95抗體100 ul

緊密連接蛋白(Ocln)ELISA試劑盒PSGL-1/CD162  P選擇素糖蛋白配體1抗體100 ul

金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MTP1)ELISA試劑盒PSMD9  蛋白酶調(diào)解因子9100 ul

金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒LMP2  低分子質(zhì)量蛋白2抗體100 ul