熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問(wèn)題可以通過(guò)熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過(guò)PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說(shuō)，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為T(mén)aqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問(wèn)題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過(guò)熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
酸氟替卡松（標(biāo)準(zhǔn)品）(C14H21NO14S)n 5-芐氧基吲哚-甲

哌拉西林鈉C8H14O2S22-溴-2'-氟苯乙酮

哌拉西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)C6H15NO9SL-天門(mén)冬氨酸鎂

環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺C6H13NO5·HCl1H-吡咯并[3,2-B]吡啶-2-羧酸

環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺（標(biāo)準(zhǔn)品）C21H25NO45-溴-2-芐氧基-6-甲基吡啶

頭孢西丁鈉C20H24O6DL-氨基-(2-萘基)酸

頭孢西丁鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）C20H24O72-(*基硅基)噻吩

頭孢西丁酸（頭孢西丁）C33H452-噻吩乙

頭孢西丁酸（頭孢西丁）（標(biāo)準(zhǔn)品）C33H45NO101-(羥基-甲氧基苯基)-甲基-1-丁酮

纈沙坦C34H47NO10甲苯肼

纈沙坦（標(biāo)準(zhǔn)品）C35H51NO102,二氟氯苯

格列吡 C35H492-氧代-2H-吡喃-甲酸甲酯

格列吡 （標(biāo)準(zhǔn)品）C33H44O17苯甲酰苯

鹽酸多奈哌齊I型C55H85O24Na2-(三氟甲氧基)芐胺

雌酚酮/雌酮C5H12O54,4'-二甲基三苯胺

雌酚酮/雌酮（標(biāo)準(zhǔn)品）C21H26N2O3 HCL(S)-(-)-alpha-(Boc-氨基)-gamma-丁酸內(nèi)酯

鹽酸克林霉素C10H14N2溴-2-三氟甲酸

鹽酸克林霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)C51H84O22N,N-二甲基磺酰胺
滅鮭氣單胞菌探針?lè)晒釶CR檢測(cè)試劑盒尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒Phospho-Bcl-2 (Thr56)  磷酸化Bcl-2抗體100 ul

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒Phospho-Bad(Ser112)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體5 mg

腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒Phospho-Bad(Ser136)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體100 ug

腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)ELISA試劑盒Phospho-Bad(Ser155)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體100 ul

腦啡肽原B(PDYN)ELISA試劑盒Bcl-6/5  原癌基因Bcl-6抗體100 ul

腦啡肽原A(PENK)ELISA試劑盒Bcl-10/CLAP  Bcl-10抗體100 ul

腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒Bcl-xL  Bcl-xL蛋白抗體300 ul

內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒BBC3/PUMA  p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體100 ul

內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒phospho-Bcl-xL(Ser62)  磷酸化Bcl-xL(pSer62)抗體1 vial
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。