實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

3-巰-1,2,4-三唑 97%人抗流行性出血熱病抗體IgM(EHF)免疫試劑盒癌胚抗原相關粘附分子1抗體phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182)  化絲裂原活化的蛋白激酶p38β抗體

三氧化硫-吡啶復合物 97%人抗流行性出血熱病抗體(IgG)免疫試劑盒趨化樣因子受體1抗體phospho-MAP4K4(Ser801)  化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體

四丁氟化銨，三水 90%人抗脂酰乙抗體(IgM)免疫試劑盒造血干抗原CD133抗體phospho-MAP4K4(Ser631)  化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體

L-茶氨 98%人抗脂酰乙抗體(IgG)免疫試劑盒G蛋白偶聯受體相互作用蛋白1抗體（補體Clq TNF相關蛋白1）phospho-MAP4K4(Ser629)  化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體

L-茶氨 99%人抗脂酰乙抗體(IgA)免疫試劑盒心肌營養素1抗體phospho-MAP4K1(Ser171)  化造血祖激酶抗體

三乙三氫氟鹽  97%人抗脂酰抗體(IgG)免疫試劑盒C型凝集素結構域家族1成員B抗體phospho-MAP4(Ser941)  化微管相關蛋白4抗體

疊氮化四丁銨  95%人抗脂酰絲氨抗體(APSA)免疫試劑盒陽離子通道相關蛋白β亞抗體phospho-MAP4(Ser1073)  化微管相關蛋白4抗體

十二烷硫鈉 CP人抗脂酰甘油抗體(IgM)免疫試劑盒特異性蛋白57抗體phospho-MAP4(Ser1046)  化微管相關蛋白4抗體

十二烷硫鈉 Ph. Eur，USP級，92%人抗脂酰甘油抗體(IgG)免疫試劑盒L選擇素抗體phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266)  化絲裂原活化蛋白激酶3K9抗體

十二烷硫鈉 AR，92.5-100.5%人抗脂酰甘油抗體(IgA)免疫試劑盒CD53抗體Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290)  化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體

十二烷硫鈉 97%，電泳人抗脂酰膽堿抗體(IgM)免疫試劑盒死亡同源蛋白6抗體Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400)  化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體

十二烷硫鈉 99.0%，超純級人抗脂酰膽堿抗體(IgG)免疫試劑盒離子通道KB抗體phospho-MAP3K7IP1(Thr431)  化轉化生長因子β活化激酶結合蛋白1抗體

十二烷硫鈉 ACS人抗脂酰膽堿抗體(IgA)免疫試劑盒C型凝集素結構域家族12成員A抗體phospho-MAP3K7IP1(Ser423)  化轉化生長因子β活化激酶結合蛋白1抗體

十二烷硫鈉 分子生物學級，≥98.5% (GC)人抗壁抗體(TA)免疫試劑盒離子通道蛋白2抗體Phospho-MAP2(Ser136)  化微管相關蛋白2抗體

十二烷硫鈉 離子對色譜級，≥99.0% (GC)人抗鏈球菌溶血素O抗體(IgM)免疫試劑盒C型凝集素結構域家族9成員A抗體Phospho-MAP2 (Thr1620/1623)  化微管相關蛋白2抗體
土壤多酚氧化酶（PPO）血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷Human, Mouse

信號通路Wnt1抗原6,7,4'-三羥異黃Human

包含氧化還原酶的WW域抗原6-氧二氫血根Human, Rat

X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原6-氧山柰酚-3-O-蕓香糖苷Human, Mouse

XIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗原6-姜酚(姜辣素)Human, Mouse

X射線修復交叉互補蛋白/切除修復因抗原6-姜烯酚（標準品）Human

胞質緊密粘連蛋白1抗原6-羥(標準品)Human, Mouse

ARC(多肽抗原)6-異麥冬黃烷A(標準品)Human, Mouse

血管緊張素Ⅱ受體(抗原)7,4'-二羥黃（標準品）Human, Mouse, Rat

半糖腦苷脂酶抗體Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC  熒光素標記化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG

G蛋白偶聯受體激酶5抗體p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體IgG