中華根瘤菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
胞裂蛋白11(SEPT11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　大腸埃希菌　25g

胞裂蛋白13(SEPT13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黑附球菌　5g

胞裂蛋白14(SEPT14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥98%　棒桿菌屬　25g

胞裂蛋白2(SEPT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥98%　球黑孢菌　5g

Sestrin 3蛋白(SESN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　長枝木霉　25g

Sestrin 1蛋白(SESN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　水生拉恩氏菌　5g

互生蛋白β2(SNTβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　大腸埃希氏菌　1g

互生蛋白γ1(SNTγ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　阿爾通山堿線菌　5g

互生蛋白γ2(SNTγ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　克魯斯假絲酵母　100g

互生蛋白α1(SNTα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　阿魏側(cè)耳　25g

肌長蛋白(SSPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　慢生根瘤菌　5g

Desmuslin蛋白(DMN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　85%　鏈霉菌　1mg

伴肌動蛋白(NEB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　≥99%　強(qiáng)雄腐霉　5MG

連續(xù)蛋白(E)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　假蜜環(huán)菌　25g

Fukutin蛋白(FKTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　血紅鞘鞍醇單胞菌　5g

紡錘體蛋白2(SPIN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　96%　黑曲霉　1g

穩(wěn)定素2(STAB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　乳粉  三聚胺　100g

突觸融合蛋白4(STX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　根瘤菌　25g
中華根瘤菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒酸化粘著斑激酶抗體midnolin isoform Proin 1  中腦核仁蛋白1（抗原）100 ul

絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體midnolin isoform Proin 2  中腦核仁蛋白2（抗原）20 ul

肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）MICA(MHC class I polypeptide-relad sequence A)  一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗原100 ul

凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)MRP3(Multidrug Resistanec-Associad Proin 3)  多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)100 ul

濾泡樹突細(xì)胞分泌蛋白抗體MRP1(Multidrug Resistanec-Associad Proin 1)  多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)100 ul

纖維母細(xì)胞生長因子13抗體LRP/MVP (Lung resistance relad proin)  肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)100 ul

骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體MSLN(mesothelin)  間皮素(多肽抗原)100 ul

口蹄疫病毒A型抗體(N端)MSH2 (mutS homolog 2)  MSH2抗原100 ul

腎刷狀緣抗體NKR(Neuromedin B Receptor)  神經(jīng)激肽B受體（抗原）100 ul