梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒說明書

服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢：
    1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：產品僅用于科研檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
縮二脲 Biuret >98.0%(N) 質量規格：>98%,BR 包裝;500ml

縮二脲 Biuret >98.0%(N) 質量規格：HPLC>97%,BR 包裝;100g

聯二脲 Biurea 質量規格：HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

N,O-雙(*硅烷基)乙酰胺 N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide >75.0%(GC) 質量規格：>98%,標準品 包裝;1g

N,O-雙(*硅烷基)乙酰胺 N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide >75.0%(GC) 質量規格：>98% 包裝;5g

N,O-雙(*硅烷基)乙酰胺(25%的乙腈溶液)[*基硅化劑,用于胺化合物] N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide (25% in Acetonitrile)[Trimethylsilylating Reagent, for NH2 compounds] 質量規格：>99% 包裝;1g

1,4-雙[2-(5-苯基惡唑基)]苯[用于閃爍光譜法] 1,4-Bis[2-(5-phenyloxazolyl)]benzene [for scintillation spectrometry]>98.0%(LC&N) 質量規格：>98%,Wee1激酶抑制劑 包裝;5g

1,4-雙[2-(5-苯基惡唑基)]苯[用于閃爍光譜法] 1,4-Bis[2-(5-phenyloxazolyl)]benzene [for scintillation spectrometry]>98.0%(LC&N) 質量規格：>99%,MEK1/2抑制劑 包裝;25g

1,4-雙[2-(5-苯基惡唑基)]苯[用于閃爍光譜法] 1,4-Bis[2-(5-phenyloxazolyl)]benzene [for scintillation spectrometry]>98.0%(LC&N) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g

雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)[用于硝棉,維生素B12等的測定] Bis(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone) [for Determination of CN, Vitamin B12, etc]>97.0%(T) 質量規格：>99%,BR,可用于細胞培養  包裝;25g

雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)[用于硝棉,維生素B12等的測定] Bis(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone) [for Determination of CN, Vitamin B12, etc]>97.0%(T) 質量規格：>98%,JAK1/2抑制劑 包裝;5g

2-苯并惡唑酮 2-Benzoxazolinone >98.0%(GC&T) 質量規格：>97%,CDKs/JAK2 / FLT3抑制劑 包裝;1g

雙(4-基)二硫醚 Bis(4-nitrophenyl) Disulfide >95.0%(GC) 質量規格：>99%,BR 包裝;250mg

雙(2-基)二硫醚 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N) 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;25g

雙(2-基)二硫醚 Bis(2-nitrophenyl) Disulfide >98.0%(GC&N) 質量規格：分析標準品 包裝;100g

硼酸*酯 Trimethyl Borate >97.0%(T) 質量規格：>98%TGF-β抑制劑 包裝;25g

硼酸*酯 Trimethyl Borate >97.0%(T) 質量規格：>99%,BR 包裝;5g
梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒說明書Trichoderma│longibrachiatum Rifai 中文名稱：深綠木霉種屬:Trichoderma│longibrachiatum Rifai分離基物:堿性土壤 PH8.0提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Boletus│obscureumbrinus Hongo 中文名稱：暗紅蓋牛肝菌種屬:Boletus│obscureumbrinus Hongo分離基物:樟子松凋落物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire 中文名稱：細極鏈格孢種屬:Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire分離基物:葉片提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:26存儲條件:定期移植法 純度：97%

Eurotium│niveoglaucum (Thom & Raper) Malloch & Cain 中文名稱：雪白-灰綠曲霉種屬:Eurotium│niveoglaucum (Thom & Raper) Malloch & Cain分離基物:食藥用真菌二級種提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：95%

Fusarium│sp. 中文名稱：鐮刀菌種屬:Fusarium│sp.分離基物:種子提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：95%

Monilia│erythraea Shear & B.O. Dodge 中文名稱：橙色串珠霉種屬:Monilia│erythraea Shear & B.O. Dodge分離基物:食藥用真菌二級種提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：95%

Pseudomonas azotoformans Iizuka and Komagata 中文名稱：產氮假單胞菌種屬:Pseudomonas azotoformans Iizuka and Komagata分離基物:葡萄提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:30存儲條件:真空冷凍干燥法；定期移植法 純度：99%

Lysobacter│gummosus Christensen and Cook 中文名稱：膠狀溶桿菌種屬:Lysobacter│gummosus Christensen and Cook分離基物:山茶葉片提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:141生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度：99%