東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒說明書

保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產品名稱：東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Eastern Equine Encephalomyelitis Virus(EEEV )RTPCR
編號：HE30905-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
?
產品僅用于科研注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經過優化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
花寶3號/N-P-K 質量規格：>98%,美國進口 包裝;100g

花寶5號/N-P-K 質量規格：>98.5%,合物 包裝;25g

反玉米素核苷/玉米素核苷/6-反式-4-羥基-3-甲基-丁-2-烯基氨基嘌呤核苷/玉精核糖甙/Trans-zeatin Riboside 質量規格：含量測定 包裝;5g

茶多酚/茶精/綠茶提取物/PPT 質量規格：檢查 包裝;1g

兒茶素/(+)-兒茶素/兒茶酚/兒茶酸/(+)-兒茶精/(+)-兒茶酸/反式-3,3ˊ,4ˊ,4,7-五羥基黃烷/(+)-Catechin hydrate 質量規格：檢查 包裝;1g

茶堿/1,3-二甲基/2,6-二氧-1,3-二甲基嘌呤/3,7-二氫-1,3-二甲基-1H-嘌呤-2,6-二酮/2,6-二羥基-1,3-二甲基嘌呤/二氧二甲基嘌呤/1,3-二甲基-3,7-二氫-1H-嘌呤-2,6-二酮/茶葉堿/Theophylline 質量規格：含量測定 包裝;25g

麥草畏/百草敵/3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸/麥草威/敵草平/麥草丹/2,5-二氯-6-甲氧基苯甲酸/Dicamba 質量規格：檢查 包裝;5g

乙酸-α-萘酯/乙酸-1-萘酯/醋酸-1-萘酯/1-乙酸萘基酯/α-乙酸萘酯/1-萘基乙酸酯/α-Napthyl acetate 質量規格：HPLC含量測定 包裝;1g

乙酸-β-萘酯/乙酸-2-萘酯/醋酸-β-萘酯/乙酸2-萘基酯/β-乙酸萘酯/2-萘基乙酯/醋酸-2-萘酯/β-萘基乙酸酯/β-Napthyl acetate 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;5g

黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽/黃素腺嘌呤二核甙酸二鈉/核黃素-5'-腺苷二磷酸二鈉/FAD/FAD-Na2 質量規格：含量測定 包裝;1g

3-氯殺螨醇/三2,2,2-三氯-1,1-雙(4-)乙醇/開樂散/1,1-二(對)-2,2,2-三/4,4`-二氯-α(三氯甲基)二苯基甲醇/1,1-雙(4-)-2,2,2-三/Dicofol 質量規格：檢查 包裝;5g

3-氨基-1,2,4-三唑/3-氨基-1,2,4-三氮茂/3-氨基-1H-1,2,4-三唑/3-氨基-1H-1,2,4-三氮唑/3-氨基-1,2,4-三氮唑/氨基三唑/1,2,4-三唑基-3-胺/殺草強/3-氨基-1，2，4-三氮雜茂/3-AT 質量規格：檢查 包裝;100g

阿特拉津/莠去津/蓋薩林/2-氯-4-乙氨基-6-異丙氨基-1,3,5-三嗪/6-氯-N-乙基-N'-(1-甲基乙基)-1,3,5-三嗪-2,3-二胺/2-氯-4-乙基胺-6-異丙胺-s-三嗪/2-氯-4-乙胺基-6-異丙胺基-均三氮苯/6-氯-N2-乙基-N4-異丙基-1,3,5-三嗪-2,4 -二胺/Atrazine 質量規格：含量測定 包裝;25g

除草劑/Basta 質量規格：檢查 包裝;5g

萎銹靈/5,6-二氫-2-甲基-N-苯基-1,4-氧硫雜環-3-甲酰胺/5，6-二氫-2-甲基-1，4-氧硫雜芑-3-甲酰/2,3-二氫-5-(N-甲酰)-6-甲基-1,4-氧硫雜芑/5,6-二氫-3-甲基-1,4-氧硫雜芑-2-甲酰替/Carboxin 質量規格：>98%,Hsp90抑制劑 包裝;100g

氯磺隆/3-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三嗪-2-基)-1-(2-)磺酰脲/綠黃隆/1-(2-磺酰)3-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三嗪-2-基)脲/2-氯-N-(4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-均三嗪-2-基氨基羰基)苯磺酸胺/Carboxin 質量規格：含量測定 包裝;25g

利波腺苷/異戊烯基腺嘌呤核苷/6-(γ，γ-二甲基烯丙基氨基)嘌呤核苷/2iP Riboside 質量規格：鑒別 包裝;5g
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒說明書Paracoccus│homiensis 中文名稱：海角副球菌種屬:Paracoccus│homiensis分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:分類、研究，可以用來農田土壤及環境修復微生物制劑。培養方法培養基:2生長條件:28℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：97%

Mortierella│alpina 中文名稱：高山被孢霉種屬:Mortierella│alpina提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25-28℃ 純度：AR,99%

醫學微生物菌種醫學微生物菌種 純度：AR,99%

Mycobacterium│chelonei subsp.abscessus 中文名稱：龜分枝桿菌膿腫亞種種屬:Mycobacterium│chelonei subsp.abscessus提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:標準菌種,供菌型檢定用培養方法培養基:CM0125生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Mycobacterium│avium 中文名稱：鳥分枝桿菌種屬:Mycobacterium│avium提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes應用領域:研究培養方法生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Micromonospora│violaceonigra 中文名稱：紫黑小單孢菌種屬:Micromonospora│violaceonigra分離基物:土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產生堿性溶性抗生素培養方法培養基:CM0012生長條件:35-37C存儲條件:真空冷凍干燥 純度：98%

Escherichia│coli 中文名稱：大腸埃希氏菌DH5α/pET28a-PknB-N種屬:Escherichia│coli提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:保存PknB-N基因，用于PknB-N蛋白表達培養方法培養基:LB+kanamycin+chloramphenicol （25微克每毫升）生長條件:37C存儲條件:-80℃冰箱凍結；真空冷凍干燥 純度：98%

Serratia│rubidaea 中文名稱：深紅沙雷氏菌種屬:Serratia│rubidaea提供形式:其他安全等級:2模式菌株:no培養方法培養基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度：98%