熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
酰嗎啉(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SQSTM1/p62 (Ser403) (D8D6T) Rabbit mAb甲氧基水楊酸甲酯

(S)-2,6-二叔丁氧羰基氨基己酸LIN28A (A177) Antibody十六烷

BOC-D-脯氨酸LIN28A (P22) Antibody二甲基鋅

BOC-L-絲氨酸甲酯EphB1 (5F10) Mouse mAb1-溴-5-氯戊烷

N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸GRK2 Antibody吡啶-2.6-二羧酸二甲酯

BOC-L-蘇氨酸SimpleChIP® Human TGFBR2 Promor Primers5-溴戊酸甲酯

Nα-叔丁氧羰基-N'-基-L-色氨酸Phospho-ALK (Tyr1278/1282/1283) Antibody2-磺酰

Boc-D-酪氨酸Phospho-ALK (Tyr1278/1282/1283) AntibodyN-(2,環(huán)氧基)鄰二甲酰

BOC-L-酪氨酸甲酯Keratin 17/19 (D32D9) XP® Rabbit mAbN-乙基環(huán)己

N-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-酪氨酸Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)1-羥乙基-甲基哌

Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸GAD2 Antibody甘油縮甲

BOC-D-纈氨酸IL-17A (D1X7L) Rabbit mAb (Mouse Specific) (PE Conjuga)2-氨基-甲氧基并噻唑

BOC-L-甘氨酸MRP3/ABCC3 (D8V8J) Rabbit mAb2-硝基亞氨基咪唑烷

BOC-L-高氨酸Tuberin/TSC2 (D57A9) Rabbit mAb2-甲氧基-5-硝基-6-甲基吡啶

BOC-D-絲氨酸甲酯FABP5 (D1A7T) Rabbit mAb2-氨基-溴乙酮 鹽酸鹽

BOC 精氨酸FABP5 (D1A7T) Rabbit mAb2-氨基-4'-溴乙酮

Fmoc-L-氨酸Gα (pan) Antibody溴化亞酮

Fmoc-L-氨酸MAVS Antibody氯-2-吡啶甲酸
艾美耳球蟲屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒β1整合素(ITG β1)ELISA試劑盒TIMP-4  金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體100 ul

α化酶(α-enolase)ELISA試劑盒TLK1  調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體20 ul

α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒Phospho-TLK1 (Ser695)  酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體100 ul

α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒TLR1  Toll樣受體1抗體20 ul

α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒TLR2/CD282   Toll樣受體2抗體100 ul

α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒TLR3   Toll樣受體3抗體20 ul

α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒TLR4/CD284   Toll樣受體4抗體100 ul

α-輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN-1)ELISA試劑盒TLR5  Toll樣受體5抗體100 ul

αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒TLR6/CD286   Toll樣受體6抗體100 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。