羊仰口線蟲PCR檢測試劑盒說明書

實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢：
    1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：產品僅用于科研檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
雷公藤紅素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 質量規格：>98% 包裝;5g

雷公藤紅素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 質量規格：HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

雷公藤紅素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 質量規格：>97.5%,BR 包裝;5g

雷公藤紅素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 質量規格：2,000-5,000 units/mg，進分 包裝;25g

雷公藤紅素/苦瓜苷 CELASTROL(P) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g

β-柏木烯/雪松烯 CEDRENE, B-(SG) 質量規格：HPLC>99%,標準品 包裝;25g

(-)-α-柏木烯 CEDRENE, (-)-alpha-(SG) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g

柏木腦 CEDROL(SG) 質量規格：>98%,BR 包裝;25g

柏木腦 CEDROL(SG) 質量規格：>95%,BR 包裝;250g

常春藤皂苷元 CAULOSAPOGENIN(SH)(SEE HEDERAGENIN) 質量規格：>99%,BR 包裝;50g

葳巖仙皂苷 C CAULOSIDE C(P)(NEW) 質量規格：>98.0%，進口原裝 包裝;1g

毛殼素 CHAETOCIN(AS) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g

毛殼素 CHAETOCIN(AS) 質量規格：>98.5%,BR 包裝;25g

α-卡茄堿 CHACONINE, ALPHA-(SH) 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;5g

α-卡茄堿 CHACONINE, ALPHA-(P)(PLEASE CALL) 質量規格：>98%,BR 包裝;1mg

1-十六烷醇/鯨蠟醇 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG) 質量規格：>99%,BR 包裝;1g

1-十六烷醇/鯨蠟醇 CETYL ALCOHOL(1-HEXADECANOL)(SG) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g
羊仰口線蟲PCR檢測試劑盒說明書Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch 中文名稱：布氏白僵菌（卵孢白僵菌）種屬:Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch分離基物:大黑腮金龜提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:鞘翅目昆蟲生物防治培養方法培養基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧生長特性卵孢白僵菌菌落粉狀，白色，生長期15天，后變為淡黃色。產孢細胞單生，很少簇生，產孢軸纖細，膝狀彎曲，具小齒突。分生孢子透明，光滑，橢圓形，基部有時有小尖突。自然狀態下寄生在蟲體生長并穿出外骨骼，在蟲體表面形成白色被覆物；產孢細胞濃密簇生，但有時輪生或單生，直接著生在氣生菌絲、稍有分化的分生孢子梗或膨大的柄細胞上，瓶狀，下部膨大，上部延長呈頸狀，在頂生的分生孢子下方不遠處再分枝產孢，反復向頂部合軸式產孢，形成具小齒突的產孢軸。存儲條件:定期移植法 純度：1.0M in THF

Phaffia rhodozyma M.W. Mill. Yoney. & Soneda 中文名稱：紅發夫酵母種屬:Phaffia rhodozyma M.W. Mill. Yoney. & Soneda提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no應用領域:產蝦紅素培養方法培養基:YM,麥芽汁生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度：1.0M in THF

Alternaria│solani Sorauer 中文名稱：茄鏈格孢種屬:Alternaria│solani Sorauer分離基物:病葉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Alternaria solani Sorauer 中文名稱：茄鏈格孢（斜面）種屬:Alternaria solani Sorauer分離基物:馬鈴薯葉片提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:馬鈴薯、葡萄糖瓊脂：取去皮馬鈴薯200克，切成小塊，加1000毫升煮沸30分鐘，濾去馬鈴薯塊，將濾液補足至1000毫升，加葡萄糖20克，瓊脂15克，溶化后分裝，15磅滅菌30分鐘。生長條件:25℃，好氧存儲條件:定期移植法 純度：98%

Termitomyces│eurhizus (Berk.) R. Heim 中文名稱：雞樅(雞菌）種屬:Termitomyces│eurhizus (Berk.) R. Heim分離基物:子實體提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食、藥菌培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：AR,99.5%

Valsa mali Miyabe & G. Yamada 中文名稱：蘋果黑腐皮殼菌（斜面）種屬:Valsa mali Miyabe & G. Yamada分離基物:蘋果樹樹皮提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:進行分析檢測及抗病性鑒定，指導。培養方法培養基:PDA瓊脂：馬鈴薯煮液 1.0L，葡萄糖 20.0g，瓊脂 15.0g，自然pH 。生長條件:25-28℃，5d存儲條件:定期移植法 純度：AR,99.5%

Suillus grevillei (Klotzsch) Singer 中文名稱：厚環粘蓋牛肝菌種屬:Suillus grevillei (Klotzsch) Singer分離基物:擔子果提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧存儲條件:定期移植法 純度：99%

Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokīn 中文名稱：金龜子綠僵菌（斜面）種屬:Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokīn分離基物:金龜子提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:24℃，好氧生長特性半知菌亞門、叢梗孢目、瘤座孢科、綠僵菌屬，金龜子綠僵菌區別于白色綠僵菌和黃綠綠僵菌的主要. 形態特征是：產孢細胞為圓柱體或窄橢圓，分生孢子圓柱. 體；而白色綠僵菌與黃綠綠僵菌的形態特征為：產孢細胞棍幫形。存儲條件:定期移植法 純度：99%