基孔肯尼雅病毒PCR檢測試劑盒說明書

產品名稱：基孔肯尼雅病毒PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Chikungunya Virus(CHIKV)RTPCR
編號：HE30801-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產品僅用于科研注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
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反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
產品僅用于科研發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。
儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經過優化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
毛地黃毒素 DIGITOXIGENIN(P)(PLEASE CALL) 質量規格：>98%,BR 包裝;250mg

洋地黃皂苷 DIGITONIN(RG) 質量規格：>98%, 進口 包裝;1g

洋地黃皂苷 DIGITONIN(RG) 質量規格：ACS 包裝;5g

(-)-二氫香芹醇 DIHYDROCARVEOL, (-)-(RG) 質量規格：AR 包裝;1g

(+)-二氫香芹醇 DIHYDROCARVEOL, (+)-(RG) 質量規格：>97%,進分 包裝;25g

二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(P) 質量規格：BS 包裝;5g

二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(P) 質量規格：>98% 包裝;25g

二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(RG) 質量規格：AR,>98% 包裝;5g

二氫辣椒素 DIHYDROCAPSAICIN(RG) 質量規格：AR, ≥99.0% 包裝;500g

16-十六內酯 DIHYDROAMBRETTOLIDE(P)(PLEASE CALL) 質量規格：>97% 包裝;1g

DIHYDROOKANIN(P)(PLEASE CALL) 質量規格：>98%,BR 包裝;5g

DIHYDROGENISTEIN(AS)(REQUEST QUOTE) 質量規格：HPLC≥98%，標準品 包裝;1mg

DIHYDROGENISTEIN(AS)(REQUEST QUOTE) 質量規格：>97%,BR 包裝;5mg

 DIGOXIN(RG) 質量規格：>98%，JAK3抑制劑 包裝;25g

DIGOXIN(RG) 質量規格：>98%,Suitable for plant cell culture 包裝;5g

IGOXIN(P)(PLEASE CALL) 質量規格：AR 包裝;1g

DIGOXIGENIN-TETRA-DIGITOXOSIDE(RG)(PLEASE CALL) 質量規格：BC 包裝;1g
基孔肯尼雅病毒PCR檢測試劑盒說明書Hygrophorus│russula (Schaeff.) Kauffman 中文名稱：紅菇蠟傘種屬:Hygrophorus│russula (Schaeff.) Kauffman分離基物:子實體提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:150生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Bacillus anthracis Cohn 中文名稱：炭疽芽孢桿菌種屬:Bacillus anthracis Cohn分離基物:果實皮層提供形式:凍干粉安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:營養肉汁瓊脂： 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃，15min。生長條件:37℃，好氧存儲條件:定期移植法 純度：95%

Streptomyces│sindenensis Nakazawa and Fujii 中文名稱：仙臺鏈霉菌種屬:Streptomyces│sindenensis Nakazawa and Fujii分離基物:喜樹提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:12生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度：98%

Penicillium│lanosum Westling 中文名稱：羊毛狀青霉種屬:Penicillium│lanosum Westling分離基物:樟子松根系土壤提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Tyromyces│lacteus (Fr.) Murrill 中文名稱：蹄形干酪菌種屬:Tyromyces│lacteus (Fr.) Murrill分離基物:闊葉樹樹枝提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Alternaria│catalpae (Ellis & Mont.) P. Joly 中文名稱：梓鏈格孢種屬:Alternaria│catalpae (Ellis & Mont.) P. Joly分離基物:梓樹葉部提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Alternaria│cerasi Potebnia 中文名稱：櫻桃鏈格孢種屬:Alternaria│cerasi Potebnia分離基物:榆葉梅葉部提供形式:斜面培養物模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Alternaria│rosicola (V.G. Rao) T.Y. Zhang & Y.L. Guo 中文名稱：薔薇生鏈格孢種屬:Alternaria│rosicola (V.G. Rao) T.Y. Zhang & Y.L. Guo分離基物:玫瑰葉部提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%