多里病毒PCR檢測試劑盒說明書

產(chǎn)品僅用于科研注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

產(chǎn)品名稱：多里病毒PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱：Dhori VirusRTPCR
編號：HE30889-R
類別:PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

儲需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
硫酸阿米卡星/硫酸丁胺卡那霉素/阿米卡霉素/O-3-氨基-3-脫氧-alpha-D-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[(6-氨基-6-脫氧-alpha-D-葡吡喃糖基-(1→4)]-N-(4-氨基-2-羥基-1-氧丁基)-2-脫氧-D-鏈霉胺硫酸鹽/Amikacin sulfate salt  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;5g

阿米卡星/丁胺卡那霉素/氨基羥丁基卡那霉素A/抗菌素BBK8/Amikacin 質量規(guī)格：>98%,BR 包裝;100g

卡莫司汀/卡氮芥/雙氯乙亞硝脲/氯乙亞硝脲/氯化亞硝脲/亞脲氮芥/1,3-雙(2-氯乙基)-1-亞Carmustine/BCNU 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;25g

莫能菌酸鈉/莫能星鈉/摩能霉素鈉/莫能霉素鈉/莫能菌素鈉/Monensin sodium 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;1g

替卡西林鈉/羧噻吩青霉素鈉/替卡西林二鈉/(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-[2-羧基-2-(2-噻吩基)乙酰氨基]-7-氧代-4-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸二鈉鹽/Ticarcillin disodium salt  質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;25g

鏈脲佐菌素/鏈脲霉素/鏈氮霉素/鏈脲菌素/鏈佐星/鏈唑霉素/2-脫氧-2-[[ (甲基亞硝基氨基)羰基]-氨基]-D-吡喃葡萄糖/STZ/Streptozotocin 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;5g

鹽酸四環(huán)素/四環(huán)素鹽酸鹽/Tetracycline HC1 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;100g

四環(huán)素/四環(huán)素堿/4-(二甲基氨基)-1,4,4A,5,5A,6,11,12A-八氫-3,6,10,12,12A-五羥基-6-甲基-1,11-二羰基-2-萘甲酰胺/Tetracycline 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;25g

頭孢曲松鈉/頭孢三嗪噻肟/(6R,7R)-7-[[(2E)-2-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)-2-甲氧基亞氨乙酰]氨基]-3-[(2-甲基-5,6-二氧代-1H-1,2,4-三嗪-3-基)硫甲基]-8-氧代-5-硫-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸/Ceftriaxone sodium 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;5g

頭孢曲松/頭孢三嗪噻肟/(6R,7R)-7-[[(2E)-2-(2-氨基-1,3-噻唑-4-基)-2-甲氧基亞氨乙酰]氨基]-3-[(2-甲基-5,6-二氧代-1H-1,2,4-三嗪-3-基)硫甲基]-8-氧代-5-硫-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸/三嗪噻肟頭孢菌素/氨噻三嗪頭孢菌素/頭孢氨噻三嗪/Ceftriaxone 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;5MG

頭孢唑啉鈉/頭孢拉定V/先鋒霉素V/唑啉頭孢菌素鈉/(6R,7R)-3-[[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)硫]甲基]-7-[(1H-四唑-1-基)乙酰氨基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸鈉鹽/Cefazolin sodium salt 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;10MG

嘌呤霉素鹽酸鹽/二氫氯化嘌呤毒素/Puromycin dihydrochloride 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;1g

多粘菌素B硫酸鹽/硫酸多粘菌素B/多勝菌素乙/多粘菌素B硫酸酯/硫酸阿羅多粘/Polymyxin B sulfate 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;250mg

多粘菌素E硫酸鹽/硫酸粘桿菌素/多粘菌素E/硫酸粘菌素/粘桿菌素B/黏菌素硫酸鹽/Colistin sulfate salt 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;100g

鏈霉素硫酸鹽/硫酸鏈霉素/O-2-脫氧-2-甲氨基-alpha-L-葡吡喃糖基-(1→2)-O-5-脫氧-3-C-甲酰基-alpha-L-來蘇呋喃糖基-(1→4)-N1,N3-二脒基-D-鏈霉胺硫酸鹽/2,4-二胍基-3,5,6-三羥基環(huán)己基-5-脫氧-2-O-(2-脫氧-2-基-Α-L-吡喃葡萄糖基)-3-C-甲酰-Β-L-來蘇戊呋喃糖甙/Strepomycin sulfate 質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 包裝;25g

鹽酸萬古霉素/萬古霉素鹽酸鹽/Vancomycin HC1 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;5g

去甲基鹽酸萬古霉素/鹽酸去甲萬古霉素/Norvoncomycin hydrochloride 質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品 包裝;100g
多里病毒PCR檢測試劑盒說明書Actinomadura│longispora 中文名稱：長孢馬杜拉放線菌種屬:Actinomadura│longispora分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:32℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法；礦物油法 純度：高純級

Nonomuraea│sp. 中文名稱：野野村氏菌種屬:Nonomuraea│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:69℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：高純級

Streptomyces│olivaceoviridis 中文名稱：橄欖綠鏈霉菌種屬:Streptomyces│olivaceoviridis分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：90%

Streptomyces│tauricus 中文名稱：公牛鏈霉菌種屬:Streptomyces│tauricus分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：90%

Streptomyces│candidus 中文名稱：純白鏈霉菌種屬:Streptomyces│candidus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:27生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：98%

Streptomyces│violens 中文名稱：呈紫色鏈霉菌種屬:Streptomyces│violens提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Degrades 4-hydroxybenzoate培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:455生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：98%

Rhodococcus│erythropolis 中文名稱：紅城紅球菌(紅串紅球菌)種屬:Rhodococcus│erythropolis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:Taxonomy/description (1300, 2019, 2184). Produces cholesterol oxidase (U.S. Pat. 3,925,164), 3-keto Δ1,4 steroids (U.S. Pat. 3,010,876). Conversion of phenol and naphthalene.培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:445生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：97%

Micromonospora│aurantiaca 中文名稱：桔橙小單孢菌種屬:Micromonospora│aurantiaca提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:代謝產(chǎn)物具有抗細菌活性。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:27生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；礦物油法；定期移植法 純度：97%
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
技術原理：
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。