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 首頁>>產品展示>>定量PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>>內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-27
點擊次數:
934
產品特點:
內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!

產品名稱

內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Entamoeba spp.

貨號

 YSP96652

熒光染料的優點:
產品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產物結合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結合到模板上,探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發出熒光。檢測到的熒光分子數與PCR產物的數量成正比,因此,根據PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題,反應結束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點:
成本高;
設計難度大;
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態性以及根據SNP區別和定量菌株。
PCR技術的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的,隨著反應循環數的增加,終PCR反應不再以指數形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產物量的變化。而在平臺期,擴增產物已不再呈指數級的增加,PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數。只有在熒光信號指數擴增階段, PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
孔雀石綠PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbL-賴氨酸

燦爛綠,亮綠Phospho-Drosophila Akt (Ser505) Antibody6-甲氧基-2,3,4,5-四氫吡啶

甲基綠THEX1 (D66A11) Rabbit mAb2,二氯-5-甲基吡啶

茜素綠;酸性綠25Phospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb(R)-縮水甘油

萘酚綠BPhospho-Akt (Thr308) (244F9) Rabbit mAb乙氧甲?;鶃喴一?/span>

固綠FCFPhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲酸

子種綠A;藍APhospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb2-甲氧基基酸

亮綠SF(淡黃)Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb甲氧基酸

健那綠BAkt3 Antibody2,3,4,6-四乙酰氧基-alpha-D-吡喃葡萄糖溴化物

酸性綠3CNOT3 (D4K4N) Rabbit mAb1-叔丁氧羰基哌

酸性綠 50 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb氯-2-吡啶甲酸

酸性綠APhospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb2-溴蒽醌

吲哚菁綠Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAbN-BOC-GAMMA-氨基丁酸

靛藍N-Cadherin Antibody9-溴菲

甲基藍CD6 (E9Y7Y) Rabbit mAb戊鈉

伊文思藍;埃文斯藍MST3b Antibody2-氨基-氯-6-甲氧基嘧啶

曲利藍LSD1 (1B2E5) Mouse mAb5-氯-2-氟

維多利亞藍B,性藍 26CXXC1 (D1R5R) Rabbit mAb2-溴-5-氟
內阿米巴通用探針法熒光PCR檢測試劑盒N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2 ELISA試劑盒TRBF1/TRF1  端粒體復制結合因子1抗體100 ul

N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒TREM1  髓系細胞觸發受體1抗體100 ul

NOGO-A ELISA試劑盒TREM2  髓系細胞觸發受體2抗體20 ul

Na-K-ATP酶ELISA試劑盒TREML1/TLT1  髓系細胞觸發受體樣轉錄因子1抗體100 ul

NAD(P)H脫氫酶(醌)1(NQO1)ELISA試劑盒TREML2/TLT2  髓系細胞觸發受體樣轉錄因子2抗體100 ul

M型肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒Transferrin  轉鐵蛋白抗體100 ul

L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒TRF2  端粒結合蛋白2抗體100 ul

L-酸脫氫酶(L-LDH) ELISA試劑盒omerase Binding Proin, P23  端粒酶結合蛋白P23抗體100 ul

KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒TRIM32  TRIM32抗體20 ul

產品相關關鍵字: 內阿米巴通用 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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