革蘭氏陽性菌蛋白提取試劑盒

產品屬性：

產品特點：

1. 提取過程十分簡便，勻漿離心即可，整個過程只需要十幾分鐘。

2. 采用*的溫和裂解成分，蛋白保持天然活性。

3.適用于各種動植物組織材料，包括新鮮或冰凍的材料。

4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D電泳、Western印跡分析以及蛋白活性測定等下游實驗。

5.一次可以處理100mg左右的樣品，足夠進行幾十次SDS-PAGE mini膠電泳檢測。

使用方法：

使用前，最好請在溶液A中加入自備的1M DTT溶液50μL。

一：勻漿法

?注意：對致密的實體組織(如肌肉)，最好用Polytron 式勻漿機勻漿處理。

1. 稱取動物或植物組織樣品100mg，剪刀剪成黃豆大小，轉移到10-15mL的塑料離心管中。

2. 加入1ml溶液A，在冰上用Polytron 式勻漿機勻漿，直到沒有肉眼可見的組織塊。為了避免產熱，可以分多次勻漿，其間放冰上讓勻漿液冷卻。

3. 將勻漿液全部轉移到1.5mL的塑料離心管中。

4. 4℃ 12000 g離心10分鐘，組織殘渣碎片將形成沉淀。

5. 將上清液轉移至一新的1.5mL塑料離心管中即得到蛋白溶液，可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要測定蛋白濃度，請使用BCA方法，不要使用Bradford方法(如果要使用，也需要把樣品稀釋10倍后再測定，否則溶液A中的成分會影響濃度側定)。如果要進行SDS-PAGE電泳，可取部分到離心管中，加入5×SDS-PAGE上樣緩沖液(終濃度為1×)，在沸水中處理5分鐘后立即上樣電泳。

注意事項：

1．如果4℃ 12000g離心10分鐘后得到的上清液中還有可見的沉淀，可以將上清轉移到一個新的離心管中后再4℃ 12000g離心10分鐘，以去除可見的小碎片。

2．植物組織中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代謝產物，如果需要除去植物蛋白樣品中殘存的色素等雜質，可以在最后得到的上清液中加入5倍體積的冷丙酮或冷甲醇，混勻后-20℃放置1小時或過夜，然后4℃,12000rpm離心10min，棄上清后室溫風干，然后將樣品溶于自備的后續實驗緩沖液中即可。經過此純化處理后，部分蛋白質可能會發生變性，不能再用于活性檢測。

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