泰勒氏菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團，3'端標(biāo)記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
細胞氧化應(yīng)激活性氧/抗氧化能力比值檢測試劑盒　HEXA ELISA Kit　100 ul

細胞丙二醛（MDA）含量比色法定量檢測試劑盒　HECTD2 ELISA Kit　20 ul

（種系）體外卵母細胞成熟（in vitro maturation；IVM）培養(yǎng)液　HECTD3 ELISA Kit　300 ul

卵母細胞凍存試劑盒　HET A Kit　100 ul

卵母細胞清理液　HELB ELISA Kit　100 ul

（種系）體外卵母細胞成熟（in vitro maturation；IVM）培養(yǎng)生長因子（20倍）　HELLS ELISA Kit　100 ul

卵母細胞核成熟苔紅素（orcein）熒光染色分析試劑盒　HEMGN ELISA Kit　100 ul

體外受精（in vitro fertilization IVF）細胞培養(yǎng)液　HDDC2 ELISA Kit　100 ul

胚胎組織培養(yǎng)液　HDDC3 ELISA Kit　100 ul

活力熒光染色試劑盒　HBA1 ELISA Kit　100 ul

活力伊紅胺黑（eosin－nigrosin）染色試劑盒　HERPUD2 ELISA Kit　20 ul

活力和頂體反應(yīng)三色（triple staining）染色試劑盒　HEATR4 ELISA Kit　100 ul

頂體形態(tài)花生凝集素?zé)晒鈽?biāo)記（PNA-FITC）染色試劑盒　HES5 ELISA Kit　1 Kit

頂體形態(tài)豌豆凝集素?zé)晒鈽?biāo)記（PSA-FITC）染色試劑盒　HESX1 ELISA Kit　100 ul

頂體形態(tài)刀豆素A凝集素?zé)晒鈽?biāo)記（ConA-FITC）染色試劑盒　HEBP2 ELISA Kit　100 ul

活力和頂體形態(tài)雙重?zé)晒馊旧噭┖小EBP1 ELISA Kit　100 ul
泰勒氏菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體PDGF-BB  血小板衍生生長因子-BB20 ul

谷胱甘肽過氧化酶1P53  P53蛋白100 ul

粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗體Osocalcin  骨鈣素20 ul

G蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體Oxytoxin  催產(chǎn)素100 ul

癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體UPAR  凝血酶受體100 ul

生長分化因子9抗體progesrone  孕酮100 ul

3-酸甘油脫氫酶抗體prolactin  催素5 mg

生長分化因子15/巨嗜細胞抑制因子1抗體Substance P  P物質(zhì)100 ul

G蛋白偶聯(lián)受體GPR91蛋白抗體BDNF  腦衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子1Kit