瑪爾摩分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Ser124) 酸化細胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格 0.1ml

品名 規(guī)格 備注

Visual Arrestin 英文名稱： 視覺抑制蛋白抗體 0.2ml

DTYMK 英文名稱： 脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體 0.2ml

Anti-Adiponectin 脂聯(lián)素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Endothelin 2 英文名稱： 內皮素2抗體 0.1ml

神經(jīng)激肽B受體抗體 Anti-NKR 0.1ml

C10orf4 英文名稱： 10號染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml

Anti-GZMB/CCPI 顆粒酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Hp-IgG(Human Helicobacter pylori IgG ) ELISA Kit 人幽門螺旋菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HSP60 熱休克蛋白-60抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MARK2 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體 規(guī)格 0.2ml

PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 96T

RGC32 英文名稱： 補體應答基因32抗體 0.1ml

仔副菌培養(yǎng)基1萬毫升/袋仔副菌培養(yǎng)基仔豬副傷寒疫苗制備

酵母蛋白胨培養(yǎng)基1萬毫升/袋酵母蛋白胨培養(yǎng)基制備豬巴氏桿菌滅活疫苗

胰酶牛肉湯1萬毫升/袋胰酶牛肉湯快疫疫苗用

雞鼻炎合成培養(yǎng)基1萬毫升/袋雞鼻炎合成培養(yǎng)基雞鼻炎滅活苗制備用

雙料乳糖膽鹽培養(yǎng)基250克Twofold Lactose Bile Salt Broth用于化妝品中糞大腸菌群的測定

液體乳糖培養(yǎng)基250克Lactose Medium用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌培養(yǎng)
瑪爾摩分枝桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒絲切蛋白抗體Proasome 20S LMP7 /FITC   熒光素標記低分子質量蛋白7抗體IgG20 ul

酸化皮層肌動蛋白抗體Melamine/HRP  辣根過氧化物酶標記抗三聚抗體IgG100 ul

酸化周期素B1抗體PS-1/FITC  熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgG100 ul

酸化周期素B1抗體PS-1/FITC  熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgG20 ul

酸化cyclin D1抗體PS-1(CT)/FITC  熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgG100 ul

CD13氨肽酶N抗體Melamine/HRP  辣根過氧化物酶標記三聚單克隆抗體IgG10 ug

巨噬細胞炎性蛋白MIP-3a抗體PSAP/PAP/FITC  熒光素標記前列腺酸性酸酶抗體IgG10 ug

間隙連接蛋白32抗體prox-1 /FITC   熒光素標記兔抗、大、prox-1蛋白抗體IgG100 ul

C端結合蛋白1抗體PSCA /FITC  熒光素標記抗前列腺干細胞抗原抗體IgG100 ul