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阿氏疏螺旋體探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-25
點擊次數(shù):
842
產(chǎn)品特點:
阿氏疏螺旋體探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次阿氏疏螺旋體探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

阿氏疏螺旋體探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Borrelia afzelii

貨號

 YSP96451

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
酸氫鈣二水(>98%,BR)AGR2 (D9V2F) XP® Rabbit mAb1-(2-氨乙基)哌啶

碳酸鈰Keratin 20 (D9Z1Z) XP® Rabbit mAb并-1,二氧六環(huán)-6-酸

胰凝蛋白酶原 AKeratin 20 (D9Z1Z) XP® Rabbit mAb6-氟-2-氯吡啶

汽巴藍Phospho-PFKFB2 (Ser483) (D4R1W) Rabbit mAb2-氨基-6-三氟

DEAE葡聚糖SignalSilence® SET8 siRNA I氯哌啶鹽酸鹽

氟啶酮(>98%,植物激素級)Ring1A (D2P4D) Rabbit mAb6-氨基-1-甲基-5-硝基尿嘧啶

組(>98%,BC)Color-coded Prestained Proin Marker1-乙基咪唑

海Color-coded Prestained Proin Marker1-(磺酰基基)哌

麥芽酸化酶, 硫酸銨懸浮液Symplekin (D5Y3T) Rabbit mAb(辛基氨基)吡啶

草酮(>95%,植物激素級)Phospho-Topoisomerase IIα (Ser1469) (D4F5) Rabbit mAb2-氟-甲基-5-溴吡啶

甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷WDR5 (D3X5B) Rabbit mAb2-氯芐溴

粘酸(>98%,BC)IQGAP2 (D1X8U) Rabbit mAb溴-5-氯-2-

N,N-二乙基對二硫酸鹽Rab1A (D3X9S) Rabbit mAb2-氯-甲酸

萘酚AS-MX酸酯(>98%,BC)TIRAP (D6M9Z) Rabbit mAb (Mouse Specific)6-羥基煙酸甲酯

肼(>98%,BC)Immunohistochemistry Application Solutions Kit (Rabbit)2-丁硫

硫酸氫(> 99%,BC)Rab25 (D3H4N) Rabbit mAb7-羥基異喹啉

草酸一水(>98%,BC)LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor®488 Conjuga)氯砜

過酸(>99%,BR)Troponin I (D6F8) Rabbit mAbN,N-二芐基乙
阿氏疏螺旋體探針法熒光PCR檢測試劑盒肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒FOXJ1/HFH-4  叉頭蛋白J1抗體100 ul

肌強直蛋白蛋白激酶(DMPK)ELISA試劑盒FoxP1  叉頭蛋白P1抗體1 Kit

肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體ELISA試劑盒FOXM1/HFH 11  叉頭蛋白M1抗體100 ul

肌腱蛋白R(TN-R)ELISA試劑盒FoxP3  叉頭蛋白P3抗體500 ul

肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒FOXO1  叉頭蛋白O1抗體100 ul

肌酐(Cr)ELISA試劑盒Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)  酸化叉頭蛋白家族抗體100 ul

饑餓激素(GHRL)ELISA試劑盒Phospho-FoxO1 (Ser319)  酸化叉頭蛋白家族1抗體100 ul

活性氧(ROS)ELISA試劑盒Phospho-FoxO1 (Ser256)  酸化叉頭蛋白家族1抗體100 ul

活化素受體樣激酶1(ALK1)ELISA試劑盒FOXO3A  叉頭蛋白O3A抗體100 ul

產(chǎn)品相關關鍵字: 阿氏疏螺旋體 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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