人皰疹病毒7型探針法熒光PCR檢測試劑盒

特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
硫鏈絲菌素2-溴鹽

二氧化硫脲(>98%,BR)吉非羅齊

吐啉(>90%,Ind Grade)順式-羥基-D-脯氨酸

胸腺嘧啶(>99%,BR)基氫化鈉

特泯菌哌啶-1-甲

二化錫二水(>98%,BR)1-羥基并三唑

草酸亞錫(>98%,BR)1-基-(二甲基氨基基)碳酰二亞鹽酸鹽

四化錫五水(>98%,BC)甲氧甲酰基亞甲基三基膦

二氧化錫(> 99%,BR)5-溴-2-二甲基氨基吡啶

硫酸亞鈦(>98%,BR)6-溴-2-吡啶甲酸甲酯

化鈦（IV）溶液溴丁酸

硫酸鈦(>96%,BR)D-2-氨基丁酸

酸三丁酯(>98%,BR)D-2-氨基丁酸

檸檬酸三丁酯(>98%,BR)N-Boc-L-哌啶-2-羧酸

原酸酯(>98%,BR)S-1-

三(4,7-二基-1,10-菲繞啉酯)釕（1mM 溶液）吡啶

胰蛋白酶原鉻酸吡啶鹽

色(>98%,BR)L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽
人皰疹病毒7型探針法熒光PCR檢測試劑盒腦蛋白CG6抗體H1N1/FITC  熒光素標記抗流感病毒A抗體IgG100 ul

晶狀體蛋白2抗體H1N1/Gold  膠體金標記抗流感病毒A抗體IgG100 ul

7號染色體開放閱讀框27抗體A/H2N2 /FITC  熒光素標記兔抗甲2（H2N2）亞型流感抗體（甲2型）IgG20 ul

癌膜相關蛋白101抗體H2AX/FITC  熒光素標記組蛋白H2AX抗體IgG100 ul

立即早期癌基因BRLF1抗體（鼻咽癌基因）Haase/FITC  熒光素標記透明質酸酶/玻璃酸酶抗體IgG100 ul

腦源神經營養(yǎng)因子抗體HA tag/FITC  熒光素標記HA tag標簽抗體IgG100 ul

β淀粉樣前體蛋白裂解酶2抗體HA tag/HRP  辣根過氧化物酶標記HA tag標簽抗體IgG100 ul

螺旋一環(huán)一螺旋蛋白5抗體HA tag/FITC  熒光素標記HA tag標簽抗體IgG100 ul

二酸3核苷酸酶抗體HA tag/HRP  辣根過氧化物酶標記HA tag標簽抗體IgG100 ul