客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

熒光定量PCR試劑盒技術：
產品僅用于科研本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設有限位凸起，下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋，側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設有環形凸起，兩個卡勾分別勾住環形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內部設有固定桿，固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
樣品RNA的抽提：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。
1,1,2,2-*(Standard for GC)Shh (C9C5) Rabbit mAb2-氯-6-氟甲酸

二硫化碳(Standard for GC, ≥99.9% (GC))RPA32/RPA2 (4E4) Rat mAb5-溴-2-三氟甲基吡啶

巴豆酸(standard for GC,≥99.9%(GC))RPA32/RPA2 (4E4) Rat mAb2-氟-硝

環戊(standard for GC,≥99.5%(GC))Toll-like Receptor 1 Antibody(氨基基)啉-酮

鄰氯(standard for GC,>99.5%(GC))Toll-like Receptor 1 Antibody5-甲氧基吲哚-2-羧酸

氯代叔丁烷(GCS,≥99.5% (GC))Jagged2 (C23D2) Rabbit mAb2-基

環己(Standard for GC,>99.5%(GC))Jagged2 (C23D2) Rabbit mAb氨基-(甲氧基基)酸

氯(standard for GC, ≥99.9% (GC))Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) Antibody溴-5-氯酚

鄰氯甲(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) Antibody(R)-(-)-氯-1,2-縮酮

鄰甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC))Glut4 (1F8) Mouse mAb3,6-二溴-9-基咔唑

間甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC))Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) Antibody2-氨基-甲酸甲酯

對甲酚(Standard for GC,≥99.7%(GC))PU.1 (9G7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)氯-2-吡啶甲酸

環戊酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))S6 Ribosomal Proin (5G10) Rabbit mAb聯

正己(standard for GC,≥99.0%(GC))S6 Ribosomal Proin (5G10) Rabbit mAb2,二氯喹喔啉

氯代仲丁烷(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-EGF Receptor (Tyr1086) Antibody環甲脒鹽酸鹽

氯代正己烷(standard for GC,≥99.5%(GC))Anisomycin5-氯-2-氟

1-氯代正戊烷(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Caspase-2 (C2) Mouse mAb2-溴-5-氟

環戊(Standard for GC,>99.5%（GC))Caspase-2 (C2) Mouse mAb5-溴-2-氯
羊痘病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒Livin  凋亡抑制蛋白抗體100 ul

α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒phospho-LKB1(Thr363)  酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體100 ul

Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)ELISA試劑盒phospho-LKB1(Ser334)  酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體20 ul

Wnt-3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒phospho-LKB1(Ser428)  酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體1 Kit

v-rel禽網狀內皮細胞過多癥病毒癌基因同源物B(RelB)ELISA試劑盒Phospho-LKB1(Thr189)  酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶抗體100µg

vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒LFABP/FABP-1  肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體100 ul

U型肌酸激酶,線粒體(CKMT1A)ELISA試劑盒LFABP/FABP-2  肝臟型脂肪酸結合蛋白抗體100 ul

UV切除修復蛋白RAD23 同源物A(RAD23A)ELISA試劑盒laminin  層粘連蛋白抗體100 ug

U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒Laminin Beta 1  層粘連蛋白β1抗體1 Kit
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．產品僅用于科研所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。