特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
酸（HPAA）（標(biāo)準(zhǔn)品）SimpleChIP® Human HoxA9 Promor Primers溴-氯三氟甲

乙酮（標(biāo)準(zhǔn)品）BRD7 (D9K2T) Rabbit mAb (ChIP Formulad)1-(2-羥乙基)-甲基氯化咪唑

甲（標(biāo)準(zhǔn)品）SimpleChIP® Human CTGF Promor Primers3,5-二氟-

氯（標(biāo)準(zhǔn)品）SimpleChIP® Human CTGF Upstream Primers氟-(三氟甲基)

乙酰（標(biāo)準(zhǔn)品）His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2-萘甲

鄰甲氧基（標(biāo)準(zhǔn)品）His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)溴-2-硝基芐

鄰氨基酚（標(biāo)準(zhǔn)品）Acetyl-Histone H3 (Lys23) (D6Y7M) Rabbit mAbN,N,N',N'-四甲基氯甲脒六氟酸鹽

2-氨基-硝（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-Rpb1 CTD (Thr4) Antibody二乙溴氫酸鹽

乙（標(biāo)準(zhǔn)品）AGPAT2 (D8W9B) Rabbit mAb2-(氯-甲酰)甲酸

乙（色譜級(jí)）Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb (PE Conjuga)5-氯-1-甲基咪唑

乙（農(nóng)殘級(jí)）Malonyl-Lysine [Mal-K] MultiMab™ Rabbit mAb mix6-喹啉甲酸乙酯

乙（99.5%(GC)）MST1 (D8B9Q) Rabbit mAb谷維素

乙（AR,99.0%）Phospho-CD79A (Tyr182) (D1B9) Rabbit mAb (PE Conjuga)(三氟甲基)-1H-咪唑

乙（光譜級(jí)）TBC1D7 (D8K1Y) Rabbit mAb乙酰基乙酰對甲氧基

乙（for DNA synthesis,≥99.9%(GC)）MED26 (D4B1X) Rabbit mAb1H-吡咯并[2,B]吡啶-羧酸甲酯

乙酰（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-NuMA (Thr2055) Antibody2,5-二氟酚

偶氮（標(biāo)準(zhǔn)品）FoxO1 (D7C1H) Mouse mAbN-甲基-D-天冬氨酸

酸洗石棉FoxO1 (D7C1H) Mouse mAb硝基二甲酮
海鷗彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)ELISA試劑盒IL-9  白介素9抗體100 ul

成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)ELISA試劑盒IL-10  白細(xì)胞介素-10抗體100 ul

成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)ELISA試劑盒IL-11  白介素11抗體100 ul

成纖維細(xì)胞生長因子13(FGF-13)ELISA試劑盒IL-10RA  白細(xì)胞介素-10受體a抗體100 ul

成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)ELISA試劑盒IL-10RB  白細(xì)胞介素-10受體β抗體1 Kit

巢蛋白1(NID1)ELISA試劑盒IL-12 (rat, mouse)  白介素12抗體 （，）100 ul

超敏熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒IL-12 (human)  白介素12抗體（）100 ul

超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA試劑盒IL-12RB1/CD212  白細(xì)胞介素-12受體β1抗體100 ul

超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試劑盒IL12RB2  白細(xì)胞介素-12受體β2抗體100 ul