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綿羊夏伯特線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-25
點(diǎn)擊次數(shù):
957
產(chǎn)品特點(diǎn):
綿羊夏伯特線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次綿羊夏伯特線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

產(chǎn)品名稱

綿羊夏伯特線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Chabertia ovina

貨號

 YSP96530

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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
1,2,3,四氯(Standard for GC)DRAK2 (33D7) Rabbit mAb吲唑-6-酸

三乙(Standard for GC, ≥99.5% (GC))C/EBPα Antibody氨基-吡啶

十三烷(Standard for GC,>99%(GC))4E-T Antibody6-溴-1H-吲唑-甲

1,1,1-三氯乙烷(包含0.05% C4H8O2 穩(wěn)定劑,standard for GC,≥99.5%(GC))Thioredoxin 1 Antibody (Mouse/Rat Preferred)(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷-2-基)-1H-吲唑

三溴(Standard for GC)Aven Antibody5-溴-甲基吡啶-2-羧酸

叔丁(analytical standard,>99.8%(GC))Phospho-DARPP-32 (Thr75) Antibody2-異基酚

十四(Standard for GC, ≥99.5% (GC))DARPP-32 Antibody[(1R)-羥基-1-基基]氨酸芐酯

(Standard for GC,>99.7%)Phospho-c-Jun (Thr91) Antibody2,5-二氯異煙酸

1,1,2-三氯乙烷(standard for GC,≥99.8%(GC))BSA (D1C8Q) Rabbit mAb氯異煙酸

1,2,*(Standard for GC,≥99.5%(GC))JNK3 (55A8) Rabbit mAbBoc-1-氨基環(huán)酸

十一烷(standard for GC,≥99.5%(GC))Sox2 (D9B8N) Rabbit mAbN-Boc-哌啶乙

十一酸(Standard for GC,≥99.0%(GC))DARPP-32 (19A3) Rabbit mAb2,二羥基-硝基吡啶

甲基壬酮(Standard for GC,≥99.5%(GC))p38γ MAPK Antibody氨基-溴-5-硝基吡啶

乙酸乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))p38γ MAPK Antibody2-羥基酸

鄰二甲(Standard for GC, ≥99.5% (GC))p38δ MAPK (10A8) Rabbit mAb5-氟-2-酚

對二甲(Standard for GC,≥99.8%(GC))p38δ MAPK (10A8) Rabbit mAb2-氯-5-氟

間二甲(Standard for GC,≥99.5%(GC))γ-Canin Antibody氟-酚

鄰二甲(Standard for GC,≥99%(GC))SirT1 Antibody氟-
綿羊夏伯特線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒Salusin Beta(Salusin β)ELISA試劑盒M2-PK/PKM2  丙酮酸激酶-M2抗體100 ul

Salusin Alpha(Salusin α)ELISA試劑盒Phospho-PKM2 (Tyr105)  酸化丙酮酸激酶M2抗體20 ul

SAA/LDL復(fù)合物 ELISA試劑盒M2-PK (pyruva Kinase M2)  丙酮酸激酶-M2100 ul

S100鈣結(jié)合蛋白P(S100P)ELISA試劑盒Ingrin alpha E2  整合素alpha E2 抗體100 ul

S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA試劑盒Ingrin alpha L/CD11a  整合素αL抗體100 ul

S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒CD11b/CD49d  整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體100 ul

S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)ELISA試劑盒Ingrin Alpha X/CD11c  整合素αX抗體100µl

S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A(S100A6)ELISA試劑盒MARCO  巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體100 ul

S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C(S100A12)ELISA試劑盒MARCKS  丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 綿羊夏伯特線蟲 染料法 熒光PCR檢測試劑盒
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