實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

3--4-氨吡啶 98%人維生素D結合蛋白(DBP)免疫試劑盒表面趨化因子受體1抗體PPP2R3A  蛋白質酶2調節亞3A抗體

吡咯-2-羧酯 98%人維生素D3(VD3)免疫試劑盒表面趨化因子受體2抗體PPP2R3  蛋白質酶2A亞3抗體

1-咪唑-5- 95%人維生素D2(VD2)免疫試劑盒表面趨化因子受體3抗體PPP2R1B  蛋白質酶2調節亞1B抗體

對異酯 98%人維生素C(VC)免疫試劑盒表面趨化因子受體4抗體PPP2R1A  蛋白質酶2調節亞1A抗體

4-硝吡唑 97%人維生素B6(VB6)免疫試劑盒活化半胱蛋白酶蛋白-3抗體PPO  腺樣癌特異性相關抗原PPO抗體

吡啶-3，4-二羧 98%人維生素B3(VB3)免疫試劑盒抗Ⅵ型膠原抗體PPM2C  蛋白酶2C抗體

2,6-吡啶二 97%人維生素B2(VB2)免疫試劑盒半胱氨蛋白酶8抗體PPM1G  蛋白質酶1G抗體（PP2Cγ）

4-磺酰異酯 96%人維生素B12(VB12)免疫試劑盒信號轉導蛋白亞8抗體PPM1F  鈣調蛋白依賴性蛋白激酶酶抗體

2-(三乙酰)吡咯 99%人維生素B1(VB1)免疫試劑盒表面趨化因子受體10抗體PPM1B  蛋白質酶1B抗體（PP2Cβ）

鹽多巴 98%人維生素A(VA)免疫試劑盒轉鐵蛋白受體抗體PPIL1  親環素相關蛋白1抗體

（±）-α-煙酚人微管相關蛋白tau(MAPT)抗體免疫試劑盒鈣粘蛋白相關的神經受體2抗體PPIG  親環蛋白（親環素）PPIG抗體

反二 CP，99.0%人微管相關蛋白2(MAP-2)免疫試劑盒周期檢測點激酶1抗體PPIB/Cyclophilin B  親環蛋白（親環素）PPIB抗體

碳胍 99%人微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)免疫試劑盒鈣粘蛋白相關的神經受體1抗體PPIA/Cyclophilin A  親環蛋白（親環素）PPIA抗體

異抗壞血鈉 98%人微管相關蛋白1A/1B輕鏈3A(MAP1LC3A)免疫試劑盒尾側型同源轉錄因子2/3抗體PPHLN1  脈周蛋白1抗體（胃癌抗原蛋白Ga50）

三氧化二銻 SP人微管微絲交聯因子1(MACF1)免疫試劑盒周期素H抗體PPARGC1A/PGC1 α  過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體
海藻糖含量小鼠脂蛋白α塔拉薩敏;塔拉烏頭(標準品)Human, Mouse

人β內啡肽苔黑酚龍膽二糖苷Human, Mouse

大鼠游離脂肪苔黑酚葡萄糖苷；地衣二葡萄糖苷（標準品）Human, Mouse

人N端前腦鈉素太子參（標準品）Human, Mouse, Rat

大鼠葉太子參環肽B（標準品）Human, Mouse, Rat

小鼠大內皮素檀香（標準品）Human

小鼠凝血因子Ⅷ相關抗原唐古特大黃（標準品）Human, Mouse

人前心鈉肽桃金娘根（標準品）Human, Mouse

大鼠組蛋白H2b桃仁（標準品）Human

纖維母生長因子受體底物3抗體Phospho-p90RSK (Ser380) /FITC  熒光素標記化絲氨/蘇氨激酶p90RSK蛋白抗體IgG

纖維連接蛋白抗體Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC  熒光素標記化絲氨/蘇氨激酶p90RSK蛋白抗體IgG