實驗通用規則：

1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。

4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。

5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。

7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。

8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

儀器：

1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）

3、臺式離心機

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

樣本收集與前處理：

血清（漿）可直接測定。

紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。

動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。

培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。

具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

青霉素G鈉 1650 U/mg LRRC59蛋白抗體Dog IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗犬IgM抗體

D-青霉  99%LRRC41蛋白抗體Dog IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗犬IgM抗體

2-過氧化丁酮 >52%(GC)促黃體生成素受體抗體Dog IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗犬IgM抗體

2-過氧化丁酮 CP清蛋白α抗體Dog IgM  兔抗犬IgM抗體

鄰二二乙酯 AR,99.5%核纖層蛋白B2抗體DOCK1  質分裂付出蛋白1抗體

草酰二 98%層粘蛋白α5抗體DNPK1  DNA依賴蛋白激酶催化亞抗體

高嶺土 醫藥級L-瓜氨抗體Dnmt3a  DNA轉移酶-3α抗體

(R)-(-)-3--1,2- 97%泌升高蛋白1抗體Dnmt3 Beta  DNA轉移酶-3β抗體

(R)-(+)-縮水甘油 98%溶酶體相關膜蛋白4α抗體Dnmt1  DNA轉移酶1抗體

(R)-(+)-縮水甘油 98%分化相關因14抗體DNMBP  動力結合蛋白DNMBP抗體

(S)-縮水甘油 97%β內酰酶樣蛋白2抗體DNM1L  發動蛋白樣相關蛋白1抗體

硫安普霉素 分析標準品神經突觸粘附樣分子4抗體DNase II  脫氧核糖核酶2抗體

硫安普霉素 95%可溶性半糖凝集素3結合蛋白抗體DNase I  脫氧核糖核酶1抗體

伊維茵素 97%瘦素抗體DNase gamma  脫氧核糖核酶γ抗體

磺 99%脂酯酶LPIN1抗體DNAPK/PRKDC  DNA依賴蛋白激酶催化亞抗體
紅霉素-N-脫甲基酶（ERND）測試盒周期素依賴性激酶4抗體(進口標準品) Mezlocillin sodium

周期素依賴性激酶5抗體卡巴膽（標準品） Mezlocillin sodium

1號染色體開放閱讀框200抗體卡比多巴（標準品） Mifepristone

6號染色體開放閱讀框223抗體卡鉑（標準品） Mifepristone

纖維素酶抗體卡洛芬（標準品） Mirtazapine

C型凝集素4家族E抗體卡絡磺鈉（標準品） Mirtazapine

蕈型乙酰膽受體抗體卡莫氟(標準品) 5-Fluoroorotic acid,5-FOA

蕈型乙酰膽受體M2抗體卡托普利（標準品） Mosapride Citrate

促進凋亡因抗體卡托普利二硫化物（標準品） Mosapride Citrate

γ-谷氨酰水解酶抗體SIAH2/FITC  熒光素標記泛素連接酶Siah2抗體IgG

谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶抗體PIWIL1/FITC  熒光素標記piwi樣1蛋白抗體IgG