牛型放線菌PCR檢測試劑盒說明書

服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構建

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特點優勢：
    1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：產品僅用于科研檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 產品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
纖溶酶抗纖溶酶復合物試劑盒 質量規格：>99%,BR 包裝;1g

纖溶酶/纖維蛋白溶酶試劑盒 質量規格：HPLC>99%,標準品 包裝;5g

纖連蛋白試劑盒 質量規格：>99%,BR，細胞培養級 包裝;5g

纖連蛋白試劑盒 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;25g

纖調蛋白試劑盒 質量規格：純度>99% 包裝;5g

細小病毒B19試劑盒 質量規格：>95%,BR 包裝;1g

細胞周期素A2試劑盒 質量規格：效價測定 包裝;25g

細胞周期蛋白依賴性激酶2試劑盒 質量規格：>97%,BR 包裝;5g

細胞周期蛋白A1試劑盒 質量規格：>99%,BR,用于細胞培養,藥劑造模 包裝;1g

細胞因子信號轉導抑制因子3試劑盒 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;250mg

細胞因子信號轉導抑制因子1試劑盒 質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養 包裝;250mg

細胞纖維連接蛋白試劑盒 質量規格：≥675 U/mg,USP28 包裝;1g

細胞外基質磷酸糖蛋白試劑盒 質量規格：含量測定 包裝;5g

細胞色素P450c21B/21-羥化酶試劑盒 質量規格：≥98%,BR 包裝;25g

細胞色素P450c21A/21-羥化酶試劑盒 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;5g

細胞色素P450試劑盒 質量規格：≥99.0% ,水合物 包裝;1g

細胞色素c氧化酶亞基VIB多肽1試劑盒 質量規格：HPLC>98%,標準品 包裝;100g
牛型放線菌PCR檢測試劑盒說明書Ganoderma│lucidium 中文名稱：靈芝種屬:Ganoderma│lucidium提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于食用菌。培養方法培養基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；定期移植法 純度：98%

Pleurotus│ostreatus 中文名稱：糙皮側耳種屬:Pleurotus│ostreatus提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于食用菌。培養方法培養基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；定期移植法 純度：99%

Gloeostereum│incarnatum 中文名稱：膠韌革菌(榆耳，榆蘑)種屬:Gloeostereum│incarnatum提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:食用，藥用。培養方法培養基:CM0017生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法；定期移植法 純度：99%

Trichosporon│asahii 中文名稱：阿氏絲孢酵母種屬:Trichosporon│asahii提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CM0077生長條件:30℃存儲條件:定期移植法 純度：99%

Actinomucor│elegans 中文名稱：雅致放射毛霉種屬:Actinomucor│elegans提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:制腐乳。培養方法培養基:CM0014生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Monascus anka 中文名稱：紅曲紅曲（斜面）種屬:Monascus anka提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:紅色素。培養方法培養基:麥芽汁瓊脂培養基:：麥芽膏粉130g，瓊脂15g，氯霉素0.1g，蒸餾水1L，pH6.0±0.2，121℃，15min。生長條件:30-35℃，好氧，產少量橙色孢子存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Corynebacterium│stationis 中文名稱：停滯棒桿菌種屬:Corynebacterium│stationis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:溶菌試驗。培養方法培養基:CM0002生長條件:25-28℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Bacillus│polymyxa 中文名稱：多粘芽孢桿菌種屬:Bacillus│polymyxa分離基物:活性污泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:用于污水處理培養方法培養基:CM0002生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%