原裝ELISA試劑盒與酶免elisa的原理區別使用須知

原裝ELISA試劑盒與酶免elisa的原理區別使用須知

原裝ELISA試劑盒與酶免elisa的原理：
   酶免elisa是應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠載脂蛋白M（APO-M）水平。用純化的大鼠載脂蛋白M（APO-M）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入載脂蛋白M（APO-M），再與HRP標記的載脂蛋白M（APO-M）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。ELISA試劑盒顏色的深淺和樣品中的載脂蛋白M（APO-M）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠載脂蛋白M（APO-M）濃度。
原裝ELISA試劑盒的基本原理：
   1）抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；
   2）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；
   3）酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
原裝ELISA試劑盒與酶免elisa使用須知：
   酶免elisa使用須知：
   1）嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
   2）試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
   3）請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
   4）封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
   5）濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
   6）各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，ELISA試劑盒以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
   7）所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
   8）本試劑不同批號組分不得混用。
   9）底物請避光保存。
原裝ELISA試劑盒使用須知：
   1）顯現微量的免疫沉淀反應。
   2）免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
   3）定量檢測體液中抗原或抗體成份。
   4）研究抗酶抗體的合成。
他們可能存在的弊端：
    ELISA是目前應用zui廣泛的免疫標記檢測方法。但由于ELISA自身存在的缺陷和某些人為因素都可造成實驗性誤（漏）診的發生，分析引起實驗誤差因素：
    1）試劑的運輸與貯存ELISA試劑盒熱穩定性差，遇熱后靈敏度、特異性都將降低。在37℃下放置1d相當于4℃～10℃保存1.6個月，而ELISA試劑盒的貨架壽命只有6個月，這樣就要求試劑盒的在4℃～10℃下運輸貯存，各實驗室老師在試劑盒貯存環節上都能達到要求，但目前尚無法保證試劑盒的冷鏈運輸，在炎熱的夏季，試劑盒經過幾天的高溫，ELISA試劑盒長途運輸，其貨架壽命也將消耗殆進，如各實驗室還按試劑說明書的有效期使用至6個月，將無法保證檢測結果的準確性。
    2）試劑盒質量試劑盒質量是關系到ELISA檢測結果準確度的核心問題，目前ELISA試劑盒的和品牌眾多，產品質量也參差不齊。