elisa酶聯免疫試劑盒樣品的稀釋檢測范圍
1.根據樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫下24小時內穩定。
2.*溶解蛋白標準品,取C液10微升稀釋至100微升,使終濃度為0.5mg/mL。原則上,蛋白樣品在什么溶液中,標準品應用什么溶液稀釋。但我們強烈建議使用三蒸水稀釋標準品及樣品。
3.標準品的稀釋:標準曲線的濃度范圍應在20-2000μg/mL之間。建議使用倍比稀釋法;建議取4~6個不同的濃度做標準曲線;建議每個濃度做2~3個復孔。
4.蛋白樣品的稀釋:將待測蛋白樣品稀釋到標準曲線所能檢測的范圍內。在eppendorf管中對待測蛋白進行稀釋,混勻??捎萌芙獾鞍椎囊后w進行稀釋,但我們建議使用三蒸水稀釋標準品。
5.在96孔板各孔中加入200μLBCA工作液,再在每孔中分別加入已稀釋好的標準品和蛋白樣品各20μL,建議標準品做2~3個復孔。37℃放置30分鐘。
6.測定A562nm處的吸光度值,540-595nm之間的波長也可接受。根據標準曲線計算出蛋白濃度。
elisa酶聯免疫試劑盒的實驗質量控制
(1)確定控制的對象;
?。?)規定控制對象的標準(預期值);
(3)制定或選擇控制方法和手段;
(4)測量實際數據;
?。?)比較或較對實際數據與預期值之間的差異,并說明產生這一差異的原因。超出預定誤差范圍,報警系發出信號,反饋通道中斷。
?。?)采取行動,解決差異?;謴驮瓲睿ㄔ瓨藴薁顟B)的手段發揮作用。質量控制主要采用質控圖進行。質控圖是把某一檢驗的性能數據與所計算出來的預期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數據是在按規程正常進行時,按時間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統計計算出來的。