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    小鼠ELISA試劑盒的操作步驟是怎樣的?

    點擊次數:397 更新時間:2023-07-13
     
      小鼠ELISA試劑盒是一種常用的實驗方法,用于檢測小鼠樣本中特定蛋白質的濃度。下面是一般的小鼠ELISA試劑盒操作步驟:
     
      1、樣本處理:
     
      a.收集小鼠組織或液體樣本,如血清、血漿或細胞上清。
     
      b.將收集的樣本置于離心管中,并離心10-15分鐘以去除固體顆粒和細胞殘渣。
     
      c.將上清轉移到新的離心管中,避免帶入沉淀。
     
      d.如有必要,將樣本進行稀釋,以確保其濃度處于試劑盒檢測范圍內。
     
      2、準備試劑:
     
      a.將試劑盒中的所有試劑和標準物品室溫恢復至室溫。
     
      b.打開并標記試劑瓶,以避免混淆。
     
      c.預先稀釋試劑盒中的穩定洗滌緩沖液,按照說明書中的建議進行稀釋。
     
      3、酶標板涂層:
     
      a.取出所需數量的酶標板,并用洗滌緩沖液洗滌。
     
      b.向每個酶標板孔中加入所需的涂層抗體或其他適當的試劑。
     
      c.封閉孔板,并在37°C下靜置1-2小時,或根據說明書上的指導進行孵育。
     

    小鼠ELISA試劑盒

     

      4、洗滌:
     
      a.將洗滌緩沖液加入洗滌緩沖液槽中。
     
      b.倒掉洗滌緩沖液槽中的液體,將酶標板孔倒置在紙巾上以排出殘留液體。
     
      c.將每個孔部分填滿洗滌緩沖液,然后輕輕拍打孔板以去除液體。
     
      d.重復以上步驟3次,確保充分洗滌。
     
      5、樣本添加:
     
      a.向每個酶標板孔中加入已稀釋的樣本、對照標準品和負對照。
     
      b.封閉孔板,并在室溫下孵育一段時間,按照說明書上的要求進行。
     
      6、洗滌:
     
      a.重復步驟4中的洗滌步驟,以去除未結合的物質。
     
      7、底物加入:
     
      a.向每個酶標板孔中加入底物溶液。
     
      b.封閉孔板,并在室溫下進行孵育,按照說明書上的建議時間。
     
      8、停止反應:
     
      a.向每個酶標板孔中加入停止溶液,以終止化學反應。
     
      9、測量讀數:
     
      a.使用酶標儀測量各個孔的吸光度值,一般為450nm或其他特定波長。
     
      b.將吸光度值與標準曲線進行比較,計算樣本中目標蛋白質的濃度。
     
     
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